空氣中的活性粒子是潔凈室中需要檢測的重要對象之一,活性粒子本身可能攜帶活微生物,或其本身就是活微生物粒子。空氣中的活性粒子(下稱浮游菌),其含量的多少會直接影響無菌藥品的滅菌程度。
一、采樣裝置浮游菌的采樣裝置一般分為主動式和被動式:
? 被動式:如落菌盤。
? 主動式:如撞擊采樣器、沖擊采樣器、濾膜采樣器
由于被動式采樣法只能反映活性粒子在物體表面的沉降率,無法反映出空氣中浮游菌的總數,因此檢測浮游菌主要采用主動式空氣采樣裝置。采集效率是主動式采樣裝置主要的性能指標,可以從物理效率和生物效率兩方面做出評估。
? 物理效率:指將各種粒徑的粒子采集到樣本中的能力。
? 生物效率:指將攜帶微生物的粒子采集到樣本中的能力。
采用撞擊或沖擊原理的取樣器,在采樣時會將空氣吸入采樣裝置,使其所含有的活性粒子撞擊到培養基上。撞擊的速度應兼顧物理效率和生物效率,即速度高到足以捕獲小至1μm的活性粒子(物理效率),低到不會對細菌或霉菌團造成機械破碎或損傷,以保證活性粒子的存活力(生物效率)。因此,物理效率和生物效率可以看做是一對矛盾的共同體,如何在兩者中做出平衡是衡量一臺主動式采樣設備采集效率的核心要素。
二、采樣方法1、測試條件
浮游菌采樣可在靜態或動態下進行,檢測時一般采用φ90 x 15mm的培養皿,內含TSA或SDA培養基。測試前,宜先進行溫濕度、風速風量和壓差、以及高效檢漏的測試,以確定浮游菌檢測的環境條件。在空態或靜態下,單向流環境的檢測宜在空調系統運行不少于10分鐘后開始;非單向流環境宜在空調系統運行不少于30分鐘后開始。同時應對各類表面進行擦拭消毒,但不得對室內空氣進行熏蒸。動態測試時應記錄生產開始的時間以及測試時間。
2、最少采樣點數目
最少采樣點數目可參照下表:
| 面積㎡ | 潔凈度級別 | |||
|---|---|---|---|---|
| 100 | 10000 | 100000 | 300000 | |
| <10 | 2~3 | 2 | 2 | 2 |
| ≥10~<20 | 4 | 2 | 2 | 2 |
| ≥20~<40 | 8 | 2 | 2 | 2 |
| ≥40~<100 | 16 | 4 | 2 | 2 |
| ≥100~<200 | 40 | 10 | 3 | 3 |
| ≥200~<400 | 80 | 20 | 6 | 6 |
| ≥400~<1000 | 160 | 40 | 13 | 13 |
| ≥100~<2000 | 400 | 100 | 32 | 32 |
| ≥2000 | 800 | 200 | 63 | 63 |
| 注:對于100級的單向流潔凈室(區),包括100級潔凈工作臺,面積指的是送風口表面積;對于10000級以上的非單向流潔凈室(區),面積指的是房間面積 | ||||
不同類型培養基的培養溫度及時間見下表:
| 培養基類型 | 培養箱溫度 | 時間 |
|---|---|---|
| TSA | 30℃~35℃ | 不少于2d |
| SDA | 20℃~25℃ | 不少于5d |
1、用計數方法得出各個培養皿的菌落數。
2、計算各測點浮游菌平均濃度:平均濃度(個/m3)= 菌落數/采樣量
五、結果判定? 每個測點的浮游菌平均濃度須低于所選定評定標準中的界限。
? 靜態下,若某個點浮游菌平均濃度超過評定標準,則應重新采樣兩次,兩次測試結均合格才能判為符合。
六、檢測周期浮游菌檢測的最長間隔時間不宜超過6個月。