(1)化學(xué)中和法:又稱中和劑法,是指在消毒劑與微生物作用到達(dá)規(guī)定時(shí)間的終點(diǎn)時(shí),取樣加于適宜種類和濃度的中和劑中,將殘留消毒劑迅速中和,使其不再持續(xù)抑制或殺滅微生物的方法。本法同時(shí)含有稀釋作用效果(至少1:1稀釋,常用1:10稀釋),是普遍使用的方法。 對(duì)常用消毒劑,雖有一些中和劑介紹,但在實(shí)際應(yīng)用中由于情況多變,效果不一定都理想。所以,在消毒試驗(yàn)前仍應(yīng)將擬用中和劑按試驗(yàn)具體情況,經(jīng)鑒定合格后再使用。
操作要點(diǎn):
①對(duì)接觸消毒劑的微生物樣本,在達(dá)到規(guī)定作用時(shí)間,即刻取樣移入鑒定合格的中和劑溶液中;
②所用中和劑的濃度與容量應(yīng)與鑒定試驗(yàn)結(jié)果規(guī)定的相同;
③即刻混勻,并按規(guī)定時(shí)間吸取樣液進(jìn)行隨后的培養(yǎng)檢測(cè);
④在將樣本接種培養(yǎng)基以前的操作,應(yīng)按規(guī)定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行,以免微生物與中和劑或中和產(chǎn)物接觸過(guò)久。
(2)過(guò)濾沖洗法 將經(jīng)消毒劑作用過(guò)的微生物樣本,立即加入適量稀釋液中混勻(通過(guò)適量稀釋,可減輕消毒劑的持續(xù)作用),并傾入裝有微孔濾膜的濾器內(nèi),接真空泵抽吸過(guò)濾(或加壓過(guò)濾)后,再加適量稀釋液沖洗,同時(shí)過(guò)濾,可去除殘留的消毒劑。多用于難以找到適宜中和劑的消毒劑試驗(yàn)中,如以植物提取物制備的消毒劑。本除藥方法應(yīng)按擬進(jìn)行試驗(yàn)具體情況,經(jīng)鑒定合格后再使用。
操作要點(diǎn):
①準(zhǔn)備好裝有相應(yīng)孔徑微孔濾膜的濾器;
②濾膜及濾器需先經(jīng)滅菌處理;
③初次過(guò)濾后,應(yīng)使用一定量對(duì)微生物無(wú)害的稀釋液進(jìn)行沖洗,沖洗次數(shù)一般以洗凈消毒劑為準(zhǔn);
④最后一次沖洗、濾凈后,將微孔濾膜以無(wú)菌操作法取出,進(jìn)行隨后的培養(yǎng)檢測(cè)。
(3)稀釋法 將經(jīng)消毒劑作用過(guò)的微生物樣本,用稀釋液稀釋,降低殘留消毒劑濃度,以消除對(duì)微生物的抑制作用。但若稀釋過(guò)多,微生物濃度下降,可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。本法可單獨(dú)使用,但更常見(jiàn)的是與其它方法同時(shí)使用。單獨(dú)使用時(shí),一般多用于濃度系數(shù)較高的消毒劑(如醇類消毒劑)。本法應(yīng)按擬進(jìn)行試驗(yàn)具體情況,經(jīng)鑒定合格后再使用。
操作要點(diǎn):
①對(duì)接觸消毒劑的微生物樣本,在達(dá)到規(guī)定作用時(shí)間后,即時(shí)以對(duì)微生物無(wú)害的稀釋液稀釋,稀釋比例隨試驗(yàn)需要決定;
②電動(dòng)混合或敲打振蕩,使之混勻;
③吸取稀釋樣液進(jìn)行隨后培養(yǎng)檢測(cè)。
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